飛諾美色譜柱是對樣品進行分離,是整個色譜系統(tǒng)的心臟,它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。檢測器是將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號,被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收,得到樣品分離的色譜圖。記錄儀或數(shù)據(jù)工作站是對色譜數(shù)據(jù)進行處理,并參與HPLC儀器的自動控制。
下面要為大家介紹的是飛諾美色譜柱的四大填裝方法:
1、壓勻漿法裝填
將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿,在其尚未沉降之前,很快以高壓泵將其以很高的流速壓進柱中,便可制備出填充均勻的柱子。這是常見的分析和制備色譜柱的裝填方法。
2、密度法裝填
在HPLC發(fā)展的早期,常采用“等密度法”來填裝柱。多孔硅膠的骨架密度較高。不同牌號的硅膠因制法不同而有差異,但多在2.2g/cm3以上。因此,需以高密度溶劑配制密度與硅膠骨架密度相近的混合液。常使用的高密度溶劑為碘代和溴代烷類,再與適當比例的其他溶劑相配,配制出具有密度適宜的液體,使填料能呈“失重”狀態(tài)懸浮于勻漿液中,以從容地用高壓泵將其壓入空色譜柱中,制出填裝均勻的色譜柱。
3、法裝填
對于粒徑較大的填料,可以用干法裝填,其基本方法與填裝氣相色譜柱類似。但需注意的一點是,在干法填裝制備液相色譜柱時,不要過分劇烈地振動和敲打。振動和敲打會使填料因自身粒徑的不均勻性而產(chǎn)生柱子整體上的不均一性,即較大的填料粒子靠近柱壁,而較細粒徑者則傾向集中于柱中心。這種柱內(nèi)顆粒分布的不均勻性,會導致柱效的降低。比較好的方法是采用小量多次的方法向柱內(nèi)加入填料,例如每次加入相當于3-5mm柱床的填料,裝一點即在實驗臺或桌面上垂直地輕輕磕幾十下,續(xù)加一些填料后,重復上述操作,直至填裝完成。
4、粘度法裝填
高粘度法,即使用黏度較高的勻漿液體系以阻止顆粒的沉降??梢圆捎靡叶?、聚乙二醇、甘油以及石蠟油等高黏度液體調(diào)配勻漿液。但是,高黏度導致流體阻力加大,必將延長裝柱時間且需使用更高的裝柱壓力,在實用上很不方便。因此,高黏度法已很少被采用。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。